簡(jiǎn)要描述:熒光產(chǎn)品特點(diǎn):1、靈敏度高,抗污染能力強(qiáng),定量準(zhǔn)確,重復(fù)性好;2、樣本處理與PCR擴(kuò)增在同一個(gè)PCR反應(yīng)管中即可完成;3、無(wú)需加熱產(chǎn)品說(shuō)明:1.高便捷性。 2.靈敏度高。 3.特異性強(qiáng)。 4.精密性好。 5.結(jié)果準(zhǔn)確可靠。 6.嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)構(gòu)及組成:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)液(PCR反應(yīng)液)、RNA本試劑盒適用于動(dòng)物組織以及食品、飼料等樣本中綿羊CYTB基因的檢測(cè)
產(chǎn)品分類(lèi)
Product Category詳細(xì)介紹
品牌 | 其他品牌 | 貨號(hào) | HXG549 |
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規(guī)格 | 50T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 科研使用 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
牛腺病毒3型(BAV-3)試劑盒(熒光-PCR法)
通用名稱(chēng):牛腺病毒 3 型(BAV-3)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光 PCR 法)
Name:Bovine Adenovirus Detection Kit(Real-Time PCR Method)
【包裝規(guī)格】50T/盒
牛腺病毒 3 型(BAV-3)是引起牛呼吸道疾病的主要病原體之一,特別是新生犢牛。臨床癥狀包括發(fā)燒,呼吸困難,鼻腔和眼結(jié)膜有分泌物等。病理變化主要出現(xiàn)在肺部,具有鮮明的肺小葉、肺氣腫和突變。血清學(xué)調(diào)查表明該病廣泛分布于世界各地,給養(yǎng)牛業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。
本試劑盒適用于檢測(cè)肺組織、呼吸道及眼鼻分泌物等樣本中的牛腺病毒 3 型,用于牛腺病毒 3 型感染的輔助診斷。
本試劑盒采用 TaqMan 探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光 PCR 技術(shù),設(shè)計(jì)一對(duì)牛腺病毒 3 型基因保守區(qū)特異性引物,結(jié)合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術(shù)對(duì)牛腺病毒 3 型基因保守區(qū)的 DNA 進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),用于臨床上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。
包裝規(guī)格 | 50T/盒 |
BAV-3 反應(yīng)液 | 500μL×2 管 |
酶液 | 50μL×1 管 |
BAV-3 陽(yáng)性質(zhì)控品 | 50μL ×1 管 |
陰性質(zhì)控品 | 250μL ×1 管 |
-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過(guò) 5 次,有效期 12 個(gè)月。
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。
捕殺牛:取肺部病變組織,5g;活牛:用滅菌棉拭子沾取牛氣管或眼鼻分泌物,然后置于裝有 0.5mL 生理鹽水的離心管中。
上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長(zhǎng)期保存可置-70℃,但不能超過(guò) 6 個(gè)月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸, 嚴(yán)禁反復(fù)凍融。
1. 樣品處理(樣本處理區(qū))
根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照;樣品每滿(mǎn) 10份,多配制 1 份),每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
步驟 | 循環(huán)數(shù) | 溫度 | 時(shí)間 | 收集熒光信號(hào) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 10min | 否 |
2 | 40 cycles | 94℃ | 15sec | 否 |
55℃ | 30sec | 是 |
1.1 結(jié)果分析條件設(shè)定
設(shè)置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線(xiàn)出現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold 的Value 值(上下拖動(dòng)閾值線(xiàn)至高于陰性對(duì)照),重新分析結(jié)果。
陽(yáng)性:檢測(cè)通道 Ct 值≤35,且曲線(xiàn)有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線(xiàn);
可疑:檢測(cè)通道 35<Ct 值≤38,建議重復(fù)檢測(cè),如果檢測(cè)通道仍為 35<Ct 值≤38,且曲線(xiàn)有明顯的增長(zhǎng)曲線(xiàn), 判定為陽(yáng)性,否則為陰性;
陰性:樣本檢測(cè)結(jié)果 Ct 值>38 或無(wú) Ct 值。
陰性質(zhì)控品:Ct>38 或無(wú) Ct 值顯示;
陽(yáng)性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線(xiàn)有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期,且 Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時(shí)滿(mǎn)足,否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
牛腺病毒3型(BAV-3)試劑盒(熒光-PCR法)【注意事項(xiàng)】
? 所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行;檢驗(yàn)過(guò)程中,參照《GB/T 27403 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品分子生物學(xué)檢測(cè)》的規(guī)定進(jìn)行。
? 試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,混勻并短暫離心;
? 反應(yīng)液應(yīng)避光保存;
? 反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;
? 使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)工作服;
? 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;
? 實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;
? 試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全 通則》進(jìn)行處理。
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保
所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
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